PDP4.4S (Park14-4)

ИПСК человека, полученные с помощью векторов на основе вируса Сендай из фибробластов кожи пациента мужского пола с болезнью Паркинсона, вызванной гетерозиготной делецией 2го экзона гена PARK2 (возраст пациента на момент взятия биопсии 40 лет).

Происхождение:

ИПСК человека, полученные с помощью векторов на основе вируса Сендай из фибробластов кожи пациента мужского пола с болезнью Паркинсона, вызванной гетерозиготной делецией 2го экзона гена PARK2 (возраст пациента на момент взятия биопсии 40 лет).

Морфология:

колонии округлых клеток с высоким ядерно/цитоплазматическим отношением

Способ культивирования:

монослойный

Условия культивирования:

культуральная среда – mTeSR1 (Stem Cell Technologies), Гибрис-8 (ПанЭко)

сыворотка – без сыворотки

другие компоненты: антибиотик 

процедура пересева: В качестве подложки для культивирования использовали Matrigel. Приготовление покрытых матригелем культуральных чашек и планшетов проводили в соответствии с инструкциями производителя. Клетки пассировали с использованием 0,05% трипсина в растворе Версена. Для инактивации трипсина клетки промывали средой ДМЕМ, содержащей 10% FBS.  При пересеве трипсином в среду для культивирования добавляли ROCK ингибитор (Y27632) в концентрации 5 мкМ. Оптимальныя плотность посева 40-60 тыс/см2 или 1:5 по площади.

криоконсервация: 10% DMSO в фетальной бычьей сыворотке, 1-2 млн клеток/мл.

Жизнеспособность после криоконсервации:

80-90%

Контроль контаминации:

Микоплазмы, другие бактерии и грибы не обнаружены.

Контроль видовой идентичности:

Кариологический анализ. ДНК-профилирование

Кариология:

46,ХУ
ДНК профиль (STR):

Locus	IPS PARK14-4	Fibroblasts Park14
Amelogenin	X, Y	X, Y
D3S1358	14, 15	14, 15
TH01	9	9
D12S391	19.1	19.1
D1S1656	14,15	14,15
D10S1248	14, 15	14, 15
D22S1045	16	16
D2S441	10, 14	10, 14
D7S820	8, 11	8, 11
D13S317	11	11
FGA	19, 21.2	19, 21.2
TPOX	8, 9	8, 9
D18S51	15, 16.1	15, 16.1
D16S539	12	12
D8S1179	13	13
CSF1PO	10.3	10.3
D5S818	11, 12	11, 12
VWA	18, 19	18, 19
D21S11	33.3	33.3
SE33	22.2, 29	22.2, 29

Область применения:

Изучение плюрипотентных стволовых клеток, направленная дифференцировка, исследовании наследственных болезни Паркинсона с помощью клеточных моделей на основе ИПСК человека.

Источник получения:

ИПСК, полученые из фибробластов кожи

Видовая принадлежность:

Человек (Homo sapiens)