PDP2.1L (IPSP12-1)

ИПСК человека, полученные с помощью лентивирусных векторов из фибробластов кожи пациента мужского пола с болезнью Паринсона, вызванной гетерозиготной дупликацией 2го экзона гена PARK2 (возраст пациента на момент взятия биопсии 54 года).

Происхождение:

ИПСК человека, полученные с помощью лентивирусных векторов из фибробластов кожи пациента мужского пола с болезнью Паринсона, вызванной гетерозиготной дупликацией 2го экзона гена PARK2 (возраст пациента на момент взятия биопсии 54 года).

Морфология:

колонии округлых клеток с высоким ядерно/цитоплазматическим отношением

Способ культивирования:

монослойный

Условия культивирования:

культуральная среда – mTeSR1 (Stem Cell Technologies), Гибрис-8 (ПанЭко)

сыворотка – без сыворотки

другие компоненты: антибиотик 

процедура пересева: В качестве подложки для культивирования использовали Matrigel. Приготовление покрытых матригелем культуральных чашек и планшетов проводили в соответствии с инструкциями производителя. Клетки пассировали с использованием 0,05% трипсина в растворе Версена. Для инактивации трипсина клетки промывали средой ДМЕМ, содержащей 10% FBS.  При пересеве трипсином в среду для культивирования добавляли ROCK ингибитор (Y27632) в концентрации 5 мкМ. Оптимальныя плотность посева 40-60 тыс/см2 или 1:5 по площади.

криоконсервация: 10% DMSO в фетальной бычьей сыворотке, 1-2 млн клеток/мл.

Жизнеспособность после криоконсервации:

80-90%

Контроль контаминации:

Микоплазмы, другие бактерии и грибы не обнаружены

Контроль видовой идентичности:

Кариологический анализ. ДНК-профелирование

Кариология:

 46ХY
ДНК профиль (STR):
 

Locus	IPSP12-1	Fibroblasts P12
Amelogenin	X,Y	X,Y
D3S1358	15, 16	15, 16
TH01	6, 9	6, 9
D12S391	19, 27	19, 27
D1S1656	11,19	11,19
D10S1248	14, 16	14, 16
D22S1045	11, 16	11, 16
D2S441	10, 11	10, 11
D7S820	9, 11	9, 11
D13S317	8, 9	8, 9
FGA	22, 23.2	22, 23.2
TPOX	8, 11	8, 11
D18S51	12.2, 14.2	12.2, 14.2
D16S539	8.3, 12	8.3, 12
D8S1179	13, 15	13, 15
CSF1PO	10, 11.3	10, 11.3
D5S818	11, 12	11, 12
VWA	17	17
D21S11	28.1, 31.1	28.1, 31.1
SE33	17.2, 28	17.2, 28

Область применения:

Изучение плюрипотентных стволовых клеток, направленная дифференцировка, исследовании наследственных болезни Паркинсона с помощью клеточных моделей на основе ИПСК человека.

Источник получения:

ИПСК, полученые из фибробластов кожи

Видовая принадлежность:

Человек (Homo sapiens)