-
Происхождение:
-
ИПСК человека, получены из мононуклеарных клеток крови пациента с синдромом Коэна
-
Автор:
-
Шнайдер Т.А., Хабарова А.А., Григорьева Е.В.
-
Морфология:
-
колонии округлых клеток с высоким ядерно/цитоплазматическим отношением
-
Способ культивирования:
-
монослойный
-
Условия культивирования:
-
среда - DMEM/F12
др. компоненты - NEAA 1%, Glutamine 1%, PenStrep 1%, 2-Mercaptoethanol 0,1 мМ, bFGF 10 нг/мл
сыворотка - нокаутный заменитель сыворотки 15%
процедура пересева - поверхность культуральной посуды покрыта 0,1% желатином, питающие клетки - 13,5 dpc фибробласты мышей линии ICR, cнятие клеток мануально, кратность пересева 1:3 - 1:6
криоконсервация - KSR 90%, DMSO 10%, 1 млн клеток/мл в ампуле
-
Жизнеспособность после криоконсервации:
-
5%
-
Контроль контаминации:
-
бактерии, грибы и микоплазма не обнаружены
-
Контроль видовой идентичности:
-
кариологический анализ
-
Кариология:
-
2n=46, XX, пределы изменчивости по числу хромосом 46-47, тетраплоиды 1,5%, модальное число хромосом 46
-
Другие характеристики:
-
Плюрипотентность показана в тестах на формирование эмбриоидных телец
COH1-/-; chr8:g.100108653dup - сдвиг рамки считывания; chr8:g.100494031G>T - замене нуклеотида в нетранслируемой последовательности донора сплайсинга, что с очень высокой вероятностью приводит к его утере и нарушению нормального процесса сплайсинга и транскрипции гена. (GRCh37/hg19)
-
Область применения:
-
биология развития, нейрогенез, синдром Коэна
-
Коллекции:
-
Коллекция плюрипотентных культур клеток человека и млекопитающих общебиологического и медичинского назначения ФИЦ Институт цитологии и генетики СО РАН, г. Новосибирск