-
Происхождение:
-
Человек, эндотелиальные клетки пупочной вены. Новорожденный.
-
Морфология:
-
Эндотелиальная
-
Способ культивирования:
-
монослойный
-
Условия культивирования:
-
Среда М199 с солями Эрла с добавками: 10% FBS, Glutamax 100x (Gibco), Sodium piruvate 100x (Gibco), ITS 100x (Gibco), Isoproterinol 0,25 мкг/мл, гидрокортизон 0,5 мкг/мл, bFGF 2,5 нг/мл, EGF 10 нг/мл, HEPES 100x (Gibco), PenStrep 100x (Gibco), гепарин 15 ед/мл.
Газовая среда (воздух) с 5% СО2
Для снятия клеток используется 0,05-0,25% трипсин с EDTA (коммерческий, например Gibco, кат. номер 25200056/25300096)
Кратность рассева 1:3 (рассев при достижении 90 % конфлюэнтности)
Время удвоения популяции - ок. 33 ч.
Условия криоконсервации: ростовая среда с 10% DMSO.
Хранить в парах жидкого азота.
-
Жизнеспособность после криоконсервации:
-
87%
Окраска трипановым синим на нулевом пассаже
-
Контроль контаминации:
-
Метод оптического анализа культуральной среды: бактерии, грибы не обнаружены.
Анализ ПЦР-РВ (чувствительность к более 50 видов микоплазм родов Mycoplasma и Acholeplasma): Микоплазма не выявлена.
-
Кариология:
-
проведено цитогенетическое исследование клеток методом GTG-дифференциального окрашивания. Проанализировано 20 метафаз.
Кариотип: 46, XX [cp20]
Заключение: нормальный женский кариотип
-
Другие характеристики:
-
STR-профиль: по запросу.
Линия с ограниченным сроком жизни (около 10 пассажей)
Экспрессирует кадгерин эндотелия сосудов и фактор фон Виллебранда.
-
Коллекции:
-
Коллекция клеточных культур Института биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН, г. Москва