-
Происхождение:
-
Человек (пол - женский), эндотелиальные клетки пупочной вены. Новорожденный.
-
Морфология:
-
полигональная
-
Способ культивирования:
-
монослойный
-
Условия культивирования:
-
Среда - HiEndoXL Endothelial Cell Expansion Medium, Reduced Serum, Basal, w/VEGF, L-Glutamine and Sodium bicarbonate w/o BBE (HIMEDIA) или аналогичные, др. компоненты - Penicillin/Streptomycin (100 ед/100 мкг).
Предобработка поверхности культуральной посуды 0,1 % раствором желатина для адгезии (5 мин, комнатная температура) опциональна.
Процедура пересева: промыть клетки 0,02 % раствором версена и подвергнуть кратковременному действию 0,25 % раствора трипсина.
Кратность рассева 1:2 - 1:3, оптимальная плотность 2,5х104 кл/см2 (соответствует 90% конфлюентности). Клетки прикрепляются к субстрату в течение 8 - 14 часов.
Криоконсервация: бессывороточная криосреда FreezeMe (Capricorn Scientific) или полная ростовая среда, содержащая 7% DMSO и 50 % эмбриональной бычьей сыворотки. 0,5 - 0,6 х 106 клеток/мл в ампуле.
-
Жизнеспособность после криоконсервации:
-
≥ 85 % (окраска трипановым синим сразу после размораживания)
-
Контроль контаминации:
-
бактерии, грибы и микоплазмы (Mycoplasma orale, M. arginini, M.fermentans, M. hominis, M. hyorhinis, M.gallisepticum, M. genitalium, M. penetrans, M. pneumonia, M. salivarium, Acholeplasma laidlawii) не обнаружены. Нуклеиновые кислоты патогенов HIV1,2, HBV, HCV, Tr.pallidum - не обнаружены.
-
Контроль видовой идентичности:
-
Кариологический анализ
-
Кариология:
-
2n=46, XХ
-
Другие характеристики:
-
Поверхностные маркеры: CD31 - 90,1%, VWF - 90,5%, CD45 - 0%, CD14 - 6,8%, альфа-актин не обнаруживается, CD34 (endothelial tip cells) - 27,7%
STR-профиль по запросу
-
Область применения:
-
биотехнология, научно-исследовательская деятельность
-
Коллекции:
-
Коллекция аллогенных донорских клеток различного происхождения Покровского банка стволовых клеток, г. Санкт-Петербург
