-
Происхождение:
-
Мышь, яйцеклетка
-
Морфология:
-
эпителиальная
-
Способ культивирования:
-
монослойный
-
Условия культивирования:
-
среда: DМЕМ/DMEM-F12 с 4,5 г/л глюкозы, 10% эмбриональной телячьей сыворотки, 2мМоль L-аланин-L-глутамина, инсулин (5мкг/мл), трансферрин (10 мкг/мл), селенит натрия (10 нг/мл, 50 нМ), 1 мкМоль андростендион.
Газовая среда (воздух) с 5 % СО2.
Для снятия клеток используется 0,05% трипсин с EDTA (коммерческий, например, Gibco, кат. номер 2500096).
Кратность рассева 1:3
Время удвоения популяции - ок 26 ч.
Условия криоконсервирования:
Ростовая среда с 10% DMSO.
Хранение в парах жидкого азота.
При размораживании перед посевом обязательно удалять среду с DMSO центрифугированием.
-
Жизнеспособность после криоконсервации:
-
89 % (окраска трипановым синим на нулевом пассаже)
-
Контроль контаминации:
-
Метод оптического анализа культуральной среды: бактерии, грибы не обнаружены.
Анализ ПЦР-РВ (чувствительность к более 50 видов микоплазм родов Mycoplasma и Acholeplasma): Микоплазма не выявлена.
-
Другие характеристики:
-
STR-профиль: по запросу.
Линия иммортализована путем трансдукции лентивирусным вектором для оверэкспрессии hTERT. Экспрессирует маркеры CYP19A, FSHR,Amh, Runx2 после более 20 пассажей.
