CAR-YT-Lact

человек, NK-клеточная лимфома, получена на базе NK-клеточной лимфомы YT путем лентивирусной интеграции кассет кодирующих химерный антигенный рецептор со специфичностью к белку человека PSMA и пептид RL2 (лактаптин)

Происхождение:

человек, NK-клеточная лимфома, получена на базе NK-клеточной лимфомы YT путем лентивирусной интеграции кассет кодирующих химерный антигенный рецептор со специфичностью к белку человека PSMA и пептид RL2 (лактаптин)

Автор:

Горчаков А.А., Кулемзин С.В., Беловежец Т.Н., Чикаев А.Н., Коваль О.А.; Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН

Публикация:

Non-adherent spheres with multiple myeloma surface markers contain cells that contribute to the sphere formation and are capable of internalizing extracellular double-stranded DNA, Dolgova EV, Shevela EY, Tyrinova TV, Minkevich AM, Proskurina AS, Potter EA, Orishchenko KE, Zavjalov EL, Bayborodin SI, Nikolin VP, Popova NA, Pronkina NV, Ostanin AA, Chernykh ER, Bogachev SS, 2016, Clin Lymphoma Myeloma Leuk; 16(10): 563-576, PubMedID: 27431933

Морфология:

округлые клетки

Способ культивирования:

суспензионный

Условия культивирования:

среда - IMDM
сыворотка - эмбриональная бычья 10%
др. компоненты - glucose 4.5 g/l, L-glutamine 4mM, HEPES 25 mM, Na-Pyruvate 1mM, PenStrep 1%
процедура пересева - каждые 2 дня суспендирование с пересевом 1:2
криоконсервация -  FBS 90%, DMSO 10%, концентрация клеток 2х10⁶ клеток/мл в ампуле

Жизнеспособность после криоконсервации:

50%

Контроль контаминации:

бактерии, грибы и микоплазма не обнаружены

Контроль видовой идентичности:

кариологический анализ

Кариология:

4n=92, XXYY, пределы изменчивости по числу хромосом 84-98, полиплоиды 12%, модальное число хромосом 92

Эффективность клонирования:

20

Туморогенность:

туморогенны

Другие характеристики:

Суспензионные клетки, при активации способны к умеренному образованию колоний по 3-8 клеток. Форма индивидуальных клеток от сферической, до умеренно неправильной.

Участок ДНК интегрировавший в геном содержит сильный конститутивный промотор гена EF1a человека, последовательность, кодирующую сигнальный пептид люциферазы копеподы Gaussia princeps (GlucSP), слитую с последовательностью, кодирующей пептид RL2 (лактаптин), маркированный гексагистидиновым эпитопом. Далее IRES-элемент кардиовируса А с последовательностью, кодирующей маркер трансдукции или трансфекции, флуоресцентный белок copGFP копеподы Pontellina plumata.

Участок ДНК интегрировавший в геном содержит сильный конститутивный промотор гена EF1a человека, последовательность, кодирующую сигнальный пептид легкой цепи иммуноглобулина каппа, слитую с последовательностью, кодирующей химерный антигенный рецептор со специфичностью к белку человека PSMA. Далее IRES-элемент кардиовируса А с последовательностью, кодирующей ген устойчивости к антибиотику зеоцин.

Область применения:

иммунология, онкология

Коллекции:

Коллекция плюрипотентных культур клеток человека и млекопитающих общебиологического и медичинского назначения ФИЦ Институт цитологии и генетики СО РАН, г. Новосибирск

Источник получения:

NK-клеточная лимфома, получена на базе NK-клеточной лимфомы YT путем лентивирусной интеграции кассет кодирующих химерный антигенный рецептор со специфичностью к белку человека PSMA и пептид RL2 (лактаптин)

Видовая принадлежность:

Человек (Homo sapiens)